- ЕЛИСА тест - шта открива? Употреба ЕЛИСА
- ЕЛИСА тест - шта је ово тест?
- ЕЛИСА тест и лајмска болест. Када наступити?
- ЕЛИСА тест - резултати. Могу ли бити лажно позитивни?
- ЕЛИСА тест - резултати. Могу ли бити лажно негативни?
ЕЛИСА тест открива бројне болести, због чега се широко користи у медицини и више. Међутим, ЕЛИСА тест је најпознатији по својој дијагнози Лајмске болести. Шта је ЕЛИСА тест? Како тумачити резултате? Која је цена теста?
Садржај:
- ЕЛИСА тест - шта открива? Употреба ЕЛИСА
- ЕЛИСА тест - шта је тест?
- ЕЛИСА тест и лајмска болест - када извршити?
- ЕЛИСА тест - цена. Колико кошта ЕЛИСА тест?
- ЕЛИСА тест - резултати. Могу ли бити лажно позитивни?
- ЕЛИСА тест - резултати. Могу ли бити лажно негативни?
ЕЛИСА тест , тј. ензимски имуносорбентни тест, је уобичајена лабораторијска метода која служи, између осталог, за квантитативну детекцију антитела у крви.
Због овогаЕЛИСА тестпронађеноапликацијау дијагностици бактеријских болести, као што јеЛајмска болест са Лајмом.
Предност ЕЛИСА методе је њена једноставност, брзо извршење и висока осетљивост. Метода ЕЛИСА се изводи коришћењем специјалних пластичних плоча са удубљењима испуњеним нпр. протеинима борелије (антигенима) и специфичним моноклонским антителима, која су дизајнирана да детектују антитела у узорку пацијента.
ЕЛИСА тест - шта открива? Употреба ЕЛИСА
Висока осетљивост и једноставност ЕЛИСА методе учиниле су је примењивом у дијагностици многих болести, али је најпознатији као дијагностички метод лајмске болести.
У дијагностици лајмске борелиозе, тзв. индиректна ЕЛИСА, која омогућава откривање специфичних ИгМ или ИгГ у испитиваном материјалу. На исти начин, антитела се могу открити у дијагностичке сврхе:
- вирусне инфекције: херпес вируси (херпес, херпес зостер, Епстеин-Барр, цитомегаловирус), ХИВ, вируси хепатитиса (ХБВ и ХЦВ)
- протозојске инфекције: токсоплазмоза, гиардијаза
- аутоимуне болести: целијакија (анти-тТГ или анти-ДПГ антитела), Хашимотова болест (анти-ТГ и анти-ТПО антитела), инфламаторне болести црева (анти-АСЦА и анти-АНЦА антитела)
- паразитске болести и алергије,у којима се детектују специфична ИгЕ антитела. Њихов повећан ниво може указивати на присуство алергија, на пример на полен и храну, или паразитске инвазије (оружана тракавица, људска округла глиста)
Постоје и модификације ЕЛИСА методе (тзв. сендвич ЕЛИСА), које омогућавају детекцију тестираног узорка протеина који нису антитела. Тада је циљ истраживања да се у биолошком материјалу открије:
- фрагменти вируса или бактерија, најчешће су то антигени специфични за дати патоген
- серумски хормони, нпр. естроген, пролактин, ТСХ, фТ4, кортизол
- ензими, нпр. калпротектин, панкреасна еластаза, алкална фосфатаза
- туморски маркери, нпр. ЦА-125
- присуство лекова у серуму
Ова метода се такође користи у прехрамбеној индустрији, где се могу открити количине алергена у траговима (нпр. млеко, кикирики), ГМО или токсина у храни.
ЕЛИСА тест - шта је ово тест?
Дијагноза нпр. Лајмске борелиозе помоћу ЕЛИСА методе се састоји у откривању имуних протеина у биолошком материјалу - антитела која настају током одговора на антигене борелије.
Антитела се тестирају у две класе, ИгМ и ИгГ. ИгМ су прва антитела која се појављују у телу након контакта са бактеријама и која временом опадају.
Њихово место заузимају упорнија ИгГ антитела која могу да остану у телу неколико десетина година.
На овај начин, присуство бактерија у телу се индиректно тестира откривањем антитела посебно усмерених против Боррелиа спирохета.
Антитела у различитим стадијумима инфекције могу бити усмерена против разних протеина борелије. На пример, у раној фази то је протеин п41.
У каснијим фазама почиње да се појављује све више протеина, као што су п21, п30, п39, п43. Због тога је дијагноза лајмске болести изузетно тешка.
Избор бактеријских протеина је изузетно важан да би тест имао високу дијагностичку вредност. Стога, рутински у дијагнози Лајмске болести треба користити ЕЛИСА тестове ИИ или ИИИ генерације, у којима се скупови протеина бирају тако да се добије најпоузданији резултат.
ЕЛИСА тест и лајмска болест. Када наступити?
Лајмска борелиоза је бактеријска болест узрокована бактеријом Боррелиа бургдорфери и њеним бројним варијететима.
Дијагноза болести није лака због сложености имунолошког одговора против борелије и несавршености лабораторијских метода.
Најраспрострањенија лабораторијска метода је високо осетљива ЕЛИСА метода која открива специфична антитела подигнута против бактеријских протеина.
У дијагнози лајмске борелиозе користи се индиректна ЕЛИСА метода у којој се разликују следеће фазе:
- инкубација базенчића на плочи са материјалом прикупљеним од пацијента, нпр. серумом. Ако у тестираном материјалу постоје антитела против борелије, она се везују за протеине на дну реакционог бунара
- затим се вишак серума испере специјалном течношћу за прање (пуфером) и тзв. коњугат, тј. антитело повезано са ензимом који се везује за претходно повезана антитела у реакционим бунарима
- Супстрат за коњугат се додаје касније и нема (позитивна) или нема реакције боје (негативна)
- последњи корак је очитавање од стране читача (спектрофотометра) концентрације антитела против борелије у серуму пацијента
ЕЛИСА метода за лајмску болест се ради са крвљу, а у случају неуролошких симптома (неуроборелиоза) и са ликвором.
Синовијалну течност не треба тестирати јер постоји велика вероватноћа лажно позитивних резултата.
Основа за дијагнозу болести су клинички симптоми који на њу указују, потврђени резултатима лабораторијских тестова.
Додавање резултата лабораторијског теста без присуства симптома не дозвољава дијагнозу лајмске болести, јер је показано да се антитела на Боррелиа спирохете такође откривају код здравих људи.
Серолошка дијагноза лајмске борелиозе почиње семи-квантитативним ЕЛИСА тестом скрининга. Ако је резултат негативан, то значи да Боррелиа спирохете нису откривене или је резултат лажно негативан.
Ако је резултат позитиван или слабо позитиван (двосмислен), потврдно Вестерн блот тестирање, које је веома специфично.
Ово је да се потврди "истинитост" резултата добијених ЕЛИСА методом. Током дијагностике, не можете прескочити ниједан од горњих корака и, на пример, извршити дијагностику коришћењем Вестерн блот методе или поставити дијагнозу на основу позитивног резултата само помоћу ЕЛИСА методе.
У Пољској се дијагноза лајмске болести врло често завршава у првој фази скрининга, што узрокује погрешну интерпретацију позитивних или слабо позитивних резултата.
Вреди знатиЕЛИСА тест - цена. Колико кошта ЕЛИСА тест?
Тест кошта око 60злота и прави се одмах. Међутим, можете сачекати око три месеца на резултате препоруке.
ЕЛИСА тест - резултати. Могу ли бити лажно позитивни?
Лажно позитивни резултати су резултат унакрсне реактивности ИгМ антитела са другим протеинима. Антитела која производи тело могу „погрешно“ да препознају антиген других микроорганизама као Боррелиа антиген.
Најчешће "грешке" се дешавају код људи заражених трепонемом паллидум, вирусом херпеса и код људи са системским еритематозним лупусом и другим реуматским обољењима.
ЕЛИСА тест - резултати. Могу ли бити лажно негативни?
Лажно негативни резултати се могу појавити у раној фази инфекције, а затим тест треба поновити након отприлике 3-4 недеље. Ово се зове серолошки прозор, односно почетни период инфекције у којем тело још није „успело“ да произведе специфична антитела.
Слично, код имунокомпромитованих људи који не производе довољно антитела.
Велики проблем, посебно код веома интензивних инфекција, представља појава тзв. имуни комплекси који се састоје од антигена Боррелиа спирохете и специфичних антитела за њих.
Ово чини антитела "невидљивима" за најчешће коришћене методе као што је ЕЛИСА, и иако су присутна у тестираном материјалу, не могу се открити.
У таквим случајевима, лабораторија може користити разбијање имунолошких комплекса. Овај третман је дизајниран да ослободи антитела. Међутим, ова метода није широко коришћена због недостатка стандардизације у лабораторијама.
Вреди знатиЗашто дијагноза лајмске болести није лака?
Ово је због сложености имунолошког одговора против борелије и ограничења лабораторијских метода. Разноликост варијетета и појава нових инфекција које изазивају инфекције, посебно на европском континенту, не олакшавају развој ефикасних дијагностичких метода.
У Европи се недавно појавило више сорти, као што су Боррелиа биссетии, Боррелиа валаисиана и Боррелиа спиелмании. Поред тога, у телу, Боррелиа спирохете могу да се претворе у цисте или да остану на местима у телу која су недоступна ћелијама имуног система.
Бити тако "невидљив" за имуни систем. Поред тога, показало се да ткива могу садржати фрагменте бактерија које имају снажна проинфламаторна својства. Верује се да су они одговорни за хроничне симптоме лајмске болести, упркос негативним резултатима студијелабораторија.
Референце
1. Витецка-Книсз Е. и сарадници Лајмска болест: зашто је дијагноза тако тешка? Лабораторијски дијагностичар април 2007.2. Мооре А. и сарадници Тренутне смернице, уобичајене клиничке замке и будући правци за лабораторијску дијагностику лајмске болести, Сједињене Америчке Државе. Емерг Инфецт Дис. јул 2016, 22 (7) .3. Лабораторијска дијагностика болести које преносе крпељи Препоруке Радне групе: Национална комора лабораторијских дијагностичара, Национални институт за јавно здравље-Национални институт за хигијену, Национални консултант у области инфективних болести, Катедра за инфективне болести и неуроинфекције, Медицински универзитет Биаłисток, Пољско друштво за вирусологију, Варшава 2014. Хоссеини С. и цо: Ензимски имуносорбентни тест (ЕЛИСА) од А до З. Спрингер 2022.
О ауторудр Каролина Карабин, молекуларни биолог, лабораторијски дијагностичар, Цамбридге Диагностицс ПолскаПо струци биолог, специјализант микробиологије, и лабораторијски дијагностичар са преко 10 година искуства у лабораторијском раду. Дипломирао је на Колеџу за молекуларну медицину и члан Пољског друштва за хуману генетику. Шеф истраживачких грантова у Лабораторији за молекуларну дијагностику на Одсеку за хематологију, онкологију и унутрашње болести Медицинског универзитета у Варшави. Одбранила је звање доктора медицинских наука из области медицинске биологије на 1. Медицинском факултету Медицинског универзитета у Варшави. Аутор многих научних и научнопопуларних радова из области лабораторијске дијагностике, молекуларне биологије и исхране. Свакодневно, као специјалиста из области лабораторијске дијагностике, води одељење садржаја у Цамбридге Диагностицс Полска и сарађује са тимом нутрициониста на ЦД Диетари Цлиниц. Своја практична знања о дијагностици и дијеталној терапији болести дели са специјалистима на конференцијама, тренинзима, у часописима и веб страницама. Посебно је заинтересована за утицај савременог начина живота на молекуларне процесе у телу.